Mikroorganizmų dydžio matavimo mikroskopu eksperimentas (su paveikslu)

Eksperimentuokite, kad mikroskopu matuotumėte mikroorganizmų dydį!

Tikslas:

Mikrometrija (mikro: mikroskopinis, metry: matavimas) yra mikroskopinių objektų matmenų matavimas pagal ilgį, plotį, skersmenį ir storį. Mikroorganizmai yra mikroskopiniai objektai, nes jie nėra matomi plika akimi ir gali būti stebimi tik mikroskopu.

Labai dažnai reikia matuoti jų matmenis pagal ilgį, plotį ir skersmenį. Dėl savo minutės dydžio matavimo matmenys turi būti atliekami mikroskopu. Taigi mikrometrijos tikslas yra matuoti mikroorganizmų matmenis mikroskopu.

Principas:

Mikroorganizmų matmenų matavimas atliekamas mikroskopu, naudojant du mikrometrus, vadinamus „mikrometrais“. Abu mikrometrai turi mikroskopines gradacijas, išgraviruotas ant jų paviršių. Vienas iš jų - „akių mikrometras“ - tai apvalus stiklo diskas, tinkantis okuliaro viduje esančiam apvaliam lentynui.

Jo paviršiuje išgraviruotos savavališkos gradacijos. Tačiau atstumas tarp išgraviruotų gradacijų yra pastovus tam tikram akių mikrometrui. Kitas mikrometras, vadinamas „stadijos mikrometru“, yra specialus stiklinis stiklas, kuris yra nukirptas į mikroskopo etapą. Jame yra standartinių gradacijų, išgraviruotų ant jo paviršiaus, kurios yra 10 µm atstumu.

Kalibravimas:

Naudojant reikiamą tikslą, akių mikrometro gradacijos kalibruojamos pagal standartinius gradientus ant scenos mikrometro. Kalibravimas reikalingas, nes atstumas tarp akių gradacijų skiriasi priklausomai nuo naudojamo tikslo, kuris lemia lauko dydį.

Kalibravimui abu mikrometrų ėsdinimo įtaisai yra uždėti, pasukant okuliarą. Išsiaiškinama, kiek akių pasiskirstymo (OD) sutampa su stadijų padalinių (SD) skaičiumi.

Iš to kalibravimo koeficientas vienam akies dalijimui (OD) apskaičiuojamas taip:

Jei 10 OD sutampa su 2 SD

10 OD = 2 SD = 2 x 10 µ = 20 µ (… 1 SD = 10 µ)

1 OD = 20/10 µ = 2 µ

Taigi atstumas tarp dviejų gretimų akių ėsdinimo yra 2 µ (ty kalibravimo koeficientas yra 2 µ).

Matavimas:

Po kalibravimo pašalinamas stadijos mikrometras, o mikrobas, kurio matmenys turi būti matuojami, yra ant stiklo ant stiklelio ir fokusuotas. Dabar skaičiuojamas mikroorganizmų užimamų akių dalijimų skaičius. Tada, padauginus šį padalinių skaičių su kalibravimo koeficientu, mikrobo dydis nustatomas taip.

Jei mikrobas užima 6 OD ilgį, tada mikrobo ilgis = 6 x kalibravimo koeficientas = 6 x 2 = 12 µ.

Mikrobų dydį galima išmatuoti tiesiogiai stebint juos ant scenos mikrometro. Taip būtų išvengta kalibravimo ir skaičiavimų. Tačiau sceninis mikrometras yra standartinė skalė, kuri brangiai kainuoja dėl to, kad ant jo yra labai smarkiai išgraviruotos. Jei dažnai naudojamasi tiesioginiam stebėjimui, jos ofortai nusidėvi.

Be to, etape mikrometruose esančios ėsdinimo medžiagos yra plačiau išdėstytos (apie 10 kartų) nei akių mikrometro. Taigi matmenys negali būti tiksliai nustatyti stadijos mikrometru. Štai kodėl; jis niekada nenaudojamas tiesioginiam matavimui.

Reikalingos medžiagos:

Akių mikrometras, sceninis mikrometras, skaidrė, mikroskopas, mikrobas.

Procedūra:

1. Iš mikroskopo išimamas okuliaras, o jo viršutinis dangtis atsukamas. Dangtis nuimamas. Atsargiai nuimkite akių lęšį (5.15 pav.). Akių mikrometras (apvalus išgraviruotas stiklo gabalas, kuris įstumia į akies gabalėlį) atsargiai įdedamas į okuliarą. Akies lęšis yra atgal ir viršutinis dangtis įsukamas į pradinę padėtį. Okuliaras yra atgal į mikroskopą.

2. Laiptinės mikrometras yra nukirptas į sceną ir išgraviruotas centruojant mechaninę pakopą.

3. Mažos galios tikslas yra nustatomas.

4. Okuliaras pasukamas, kol abiejuose mikrometruose esanti ėsdinimo medžiaga yra ant viršaus.

5. Reikalingas tikslas nustatomas. Reikalingas tikslas yra tai, kad naudojant visą mikroorganizmą galima būtų matyti ir kuo labiau apimti mikroskopinį lauką.

6. Esant reikiamam tikslui (naftos panardinimo tikslui, ant pakopos mikrometro įdedamas alyvos lašas), mechaninė pakopa perkeliama taip, kad linija ant scenos mikrometro sutaptų su linija ant akių mikrometro. Tada iš akių mikrometro ieškoma kita linija, kuri sutampa su kita stadijos mikrometro linija. Abiejų mikrometrų skaičiavimų skaičius sutampa su sutampančiomis linijomis.

7. Apskaičiuojamas taikomo tikslo kalibravimo koeficientas.

8. Panašiai apskaičiuojami kalibravimo koeficientai kitiems tikslams.

9. Laiptinės mikrometras pašalinamas.

10. Stiklelis, kuriame yra stebima mikrobiologinė medžiaga, dedamas ant scenos ir sutelkiamas.

11. Akių padalijimų, kuriems taikoma mikrobas, skaičius skaičiuojamas žiūrint pro okuliarą.

12. Mikroorganizmo dydis nustatomas dauginant akių pasiskirstymo, kurį apima mikrobas, skaičių su kalibravimo koeficientu.