Mikrobiologijos laboratorijoje naudojamos įvairios cheminės medžiagos ir žiniasklaida

Mikrobiologijos laboratorijoje naudojamos įvairios cheminės medžiagos ir žiniasklaida!

Laboratorijoje bakterijos auginamos maistinėmis medžiagomis, vadinamomis „terpėmis“. Tam tikriems tikslams taip pat reikalinga įvairi žiniasklaida.

Medžiagos komponentai pasveriami tam tikroje proporcijoje, sumaišomi reikiamame vandens kiekyje ir sterilizuojami autoklave. Bakterijos inokuliuojamos į jį ir leidžiama augti.

Medžiagų sudedamųjų dalių svėrimas yra varginantis darbas, o kai kurios sudedamosios dalys gali būti praleistos nesąmoningai. Norint įveikti šį sunkumą, dabar yra paruoštos paruoštos medijos miltelių pavidalu.

Šiose terpėse yra visos sudedamosios dalys nurodytomis proporcijomis. Tam tikram miltelių terpės kiekiui (kaip nurodyta pakuotės etiketėje) pridedamas ir sterilizuojamas nurodytas vandens kiekis.

Kultūros terpės yra šių tipų:

I. Chemiškai apibrėžta terpė:

Chemiškai apibrėžta terpė arba sintetinė terpė yra terpė, kurioje galima nustatyti visas specifines chemines medžiagas (molekules ir atomus) ir jų koncentracijas. Cheminės medžiagos gali būti H20, NaCl, Na2S04, KCI ir agaras. Pavyzdžiai: neorganinis sintetinis sultinys, gliukozės druskos sultinys.

II. Kompleksinė žiniasklaida:

Kompleksinės terpės yra žiniasklaida, kurioje negalima nustatyti visų specifinių cheminių medžiagų (molekulių ir atomų) ir jų koncentracijos. Būdingoms bakterijoms, žiniasklaidoje naudojamos kelios sudėtingos medžiagos, pvz., Jautienos ekstraktas, mielių ekstraktas ir peptonas, kurių tiksli cheminė sudėtis (molekulės ir atomai) labai skiriasi ir nėra žinoma. Šios medžiagos dažniausiai naudojamos gausiam bakterijų augimui. Pavyzdžiai: maistinių medžiagų sultinys ir maistinių medžiagų agaras.

III. Specializuota žiniasklaida:

Šios terpės naudojamos konkrečiais tikslais, o ne tik bakterijų augimui.

Remiantis naudojimo tikslu, jie yra šių tipų:

1. Pasirinktinė medija:

Jie yra terpė, kurioje yra specifinė sudedamųjų dalių sudėtis, kuri palaiko kai kurių tikslinių bakterijų augimą ir slopina kitų augimą. Jie naudojami specifinėms bakterijų grupėms izoliuoti.

Kai tam tikra bakterijų grupė auga selektyvioje terpėje, ji pasireiškia tipiškomis kolonijos savybėmis, kurios padeda aptikti ir išvardyti įvairiuose mėginiuose. Konkrečios įdomios bakterijos, aptiktos kaip izoliuotos kolonijos, yra imtasi tolesniems patvirtintų identifikavimo tyrimams. Kartais atrankinė terpė taip pat naudojama kaip diferencinė terpė.

Pasirinktinės laikmenos pavyzdžiai pateikiami toliau:

(a) „MacConkey“ agaras:

Jis naudojamas gramnegatyvių bakterijų rūšių auginimui. Vidutinėje terpėje naudojama kristalinė violetinė medžiaga slopina gramteigiamų bakterijų augimą, tuo pačiu leisdama augti gramneigiamas rūšis.

b) EMB agaras:

Eozino metileno mėlynas agaras (EMB agaras) naudojamas gramnegatyvinėms bakterijų rūšims auginti. Ji iš dalies slopina gramteigiamų bakterijų augimą, dėl to gramnegatyvios bakterijų rūšys auga juose. Jis taip pat naudojamas identifikuoti Escherichia coli formos žarnų žiurkėlius, kurie auga ant mėlynai juodų kolonijų su metaliniu žaliu blizgesiu.

Kitomis enterinėmis koliformomis, tokiomis kaip Enterobacter aerogenes, auga kaip storos, gleivinės, rausvos kolonijos. Be šių laktozės, taip pat auga ir laktozės nefomentai, bet kaip bespalvės kolonijos, už kurias jie užima violetinę medţiagos spalvą.

c) manitolio druskos agaras:

Jis naudojamas Staphylococcus spp. Aukšta druskos koncentracija (7, 5% NaCl), esanti terpėje, slopina daugelio kitų bakterijų augimą. Jis taip pat išskiria Staphylococcus į manitolį fermentuojančią Staphylococcus, kuris auga su geltonomis zonomis aplink kolonijas ir nefermentuojančią stafilokoką, kuris auga be spalvos pokyčių.

2. Diferencinė žiniasklaida:

Jie yra žiniasklaida, kurioje įvairios bakterijos auga kaip kolonijos, turinčios skirtingas vizualines charakteristikas.

Diferencijuotos medijos pavyzdžiai pateikiami toliau:

(a) „MacConkey“ agaras:

Šioje terpėje neretogeninės normalios žarnyno bakterijos, kurios yra laktozės fermentatoriai, auga kaip raudonos kolonijos, o patogeninės žarnyno bakterijos, kurios nėra fermentinės fermentacijos, auga kaip bespalvės kolonijos.

b) Kraujo agaras:

Kraujas yra svarbi šios terpės sudedamoji dalis. Tai sodrios bakterijos, tokios kaip Streptococcus spp.

Jis naudojamas skirtingoms streptokokų savybėms diferencijuoti skirtingų tipų kraujo hemolizę:

i) α-hemolizė:

Čia atsiranda dalinis RBC sunaikinimas, dėl kurio atsiranda žalios spalvos zonos aplink kolonijas dėl hemoglobino kiekio sumažėjimo iki methemoglobino.

(ii) β-hemolizė:

Čia vyksta išsami RBC hemolizė, dėl kurios aplink kolonijas atsiranda aiški zona. Ši hemolizė atsiranda dėl dviejų tipų hemolizinų, ty „streptolizino O“, kuris yra antigeninis deguonies labilis fermentas ir „streptolizinas S“, kuris yra ne antigeninis deguonies stabilus lizinas.

(iii) y-hemolizė:

Čia nėra hemolizės, dėl kurios nėra kolonijų zonos.

3. Transporto priemonės:

Tai yra terpė, naudojama trumpam bakterijų transportavimui, kurio metu augimas yra nepageidaujamas. Tokioje terpėje yra tik buferis ir druska. Terpėje nėra jokio C, N ir kitų augimo faktorių šaltinio. Jis apsaugo nuo mikrobų augimo.

4. Sodrinimo priemonės:

Tai yra žiniasklaida, kurioje reliatyvi tikslinių bakterijų dalis yra praturtinta, nes jose yra tikslinių bakterijų maistinių medžiagų, o kitoms - ne. Pavyzdžiui, išmatose yra labai mažai Salmonella ir Shigella.

Norint juos išskirti, pirmiausia jie auginami selenito sultiniu arba GN (gram-neigiamu) sultiniu, kuriame tik Salmonella ir Shigella augs gausiai, o kiti - ne augti ir išliks atsilikimo fazėje. Tuomet ši juosta yra tepama ant kietos terpės, kad gautų Salmonella ir Shigella kolonijas.

5. Išplėstinė žiniasklaida:

Jie yra žiniasklaida, naudojama palaikyti didžiausią bakterijų tipą.

6. Biocheminė terpė:

Šios žiniasklaidos priemonės naudojamos bakterijų biocheminei veiklai tikrinti, kurios padeda identifikuoti. Toliau pateikiamas svarbių biocheminių terpių, naudojamų biocheminiuose tyrimuose, skirtuose skirtingų bakterijų identifikavimui, sąrašas.