2 Serumo baltymų elektroforezės metodų tipas (su paveikslu)

Serume yra daug baltymų. 1937 m. Arne W Tiselius pristatė skirtingų baltymų atskyrimo elektriniame lauke metodą.

Elektroforezėje baltymai yra atskirti elektriniame lauke. Vėliau buvo sukurta zonos elektroforezė popieriuje arba celiuliozės acetate. 1952 m. Buvo sukurtas dviejų etapų metodas, jungiantis elektroforezę su imunodifuzija. Po to C Williams, P Graber ir M Poulik pristatė klasikinį imunelektroforezės metodą (kur tiek elektroforezė, tiek dviguba imunodifuzija atliekama su tuo pačiu dengtu agaru).

1. Zonos elektroforezė:

Baltymai gali būti atskirti pagal jų paviršiaus elektros įkrovą. Atskyrimui naudojama inertinė pagalbinė terpė, pvz., Popierius, celiuliozės acetatas arba agaras. Serumo mėginys dedamas ant pagalbinės terpės. Tuomet atraminė terpė prijungta prie elektroforezės aparato teigiamų ir neigiamų polių. Pagal elektrinį lauką baltymai įkraunami ir perkeliami per pagalbinę terpę. Jų judėjimas priklauso nuo jų elektros krūvio.

Kadangi skirtingos baltymų molekulės turi skirtingus krūvius, jie perkelia į skirtingas padėties palaikymo terpėje pozicijas. Paprastai elektroforezė atliekama 60-120 minučių ar ilgiau. Tada baltymai yra dažomi ir tiriami vizualiai arba skenuojami densitometru. Atskirų ir dažytų baltymų frakcijų densitometro nuskaitymas paverčia kiekvieną juostą į savo tipišką smailę ir padeda kiekybiškai nustatyti kiekvieną baltymų frakciją.

2. Serumo baltymų elektroforezė:

Normalus žmogaus serumas skirstomas į penkias pagrindines elektroforezines juostas: albuminą, α ₁ -globuliną, α ₂ -globuliną, β-globuliną ir y-globuliną (27.5 pav.).

Zonos elektroforezė yra naudinga diagnozuojant tam tikras žmonių ligas:

Fig. 27.5A-C:

Elektroforezė celiuliozės acetato juostelėje ir celiuliozės acetato popieriaus juostos densitometro nuskaitymas: A ir A1: normalios serumo baltymų juostos ląstelių acetato juostoje vizualizuojamos po dažymo (A) ir densitometro skenavimo iš celiuliozės acetato juostos (A1).

B ir B1: Hipergammaglobulinemija

C ir C1: Hipogammaglobulinemija

i. Daugybinė mieloma ir Waldenstromo makro-globulinemija. Šiose ligose γ-globulino regione paprastai atsiranda elektroforetiškai apribotas baltymų šuolis. Smaigalys reiškia monokloninio imunoglobulino kaupimąsi. Monokloniniai imunoglobulinai turi nustatytą paviršiaus krūvį, todėl sukuriamas smaigalys (kadangi normalus polikloninių imunoglobulinų modelis sukelia tepimą y-globulino regione).

ii. Hipogammaglobulinemija (žymiai sumažėjęs serumo gama globulinas).

iii. Hipoproteinemija (pastebimas visų serumo baltymų sumažėjimas).

iv. Hipoalbuminemija:

Albumo sumažėjimas, kuris atsiranda daugelyje kepenų ir inkstų ligų.

v. Šlapimo elektroforezė padeda aptikti laisvas imunoglobulino lengvąsias grandines, tokias kaip Bence-Jones baltymas.

vi. Cerebrospinalinio skysčio (CSF) zonos elektroforezė padeda diagnozuoti išsėtinę sklerozę ir kitus centrinės nervų sistemos sutrikimus. Serumo baltymų elektroforezė laikoma atrankos testu, skirtu baltymų nukrypimų nustatymui. Būtina atlikti tolesnę analizę tam, kad būtų galima rasti konkrečių sutrikimų.